De kwantitatieve bepaling van aminozuren in liquor vindt plaats op het LC-MS/MS systeem. Dit is een HPLC systeem gekoppeld aan een massaspectrometer. In liquor worden 18 aminozuren kwantitatief geanalyseerd. Voor glycine is een losse analyse ontwikkeld, met een aangepaste monstervoorbewerking om gevoeliger te kunnen analyseren.
Aminozuren
De volgende aminozuren worden gekwantificeerd:
Serine
Threonine
Asparagine
Asparaginezuur
Glutamine
Glutaminezuur
Alanine
Proline
Valine
Methionine
Tyrosine
Isoleucine
Leucine
Phenylalanine
Ornithine
Lysine
Arginine
Aan de liquor monsters wordt voor de kwantificering een mengsel van stabiele isotopen toegevoegd. Na eiwitprecipitatie worden de monsters op het LC-MS/MS systeem geïnjecteerd.
In liquor vindt er een scheiding van aminozuren plaats door middel van een reversed-phase kolom in combinatie met een ion-paar reagens. De 17 aminozuren (uitzondering: Glycine) worden met behulp van de on-line massaspectrometer op basis van massa/lading verhouding gedetecteerd. Er wordt een ijklijn geanalyseerd waarmee het mogelijk is om de aminozuren in liquor te kwantificeren.
Glycine
Aan de liquor monsters wordt voor de kwantificering stabiel isotoop gelabeld glycine toegevoegd. Na eiwitprecipitatie en butylering worden de liquor monsters op het LC-MS/MS systeem geïnjecteerd.
Er wordt gewerkt zonder kolomscheiding aangezien de massa/lading verhouding al voldoende specifiek is. Er wordt een ijklijn geanalyseerd waarmee het mogelijk is om Glycine in liquor te kwantificeren.
Ziektebeelden
o.a.
- Serine biosynthese defecten (o.a. 3-fosfoglyceraat dehydrogenase deficiëntie)
- non-ketotische hyperglycinemie
- vitamine B6 afhankelijke epilepsie
datum: 09-08-2010